簡 介：microRNA (miRNA) 是一類長度約22 nt的非編碼單鏈RNA，廣泛存在于動物、植物中，具有基因表達調(diào)控的功能，與生物體的生長、發(fā)育、癌癥的發(fā)生等現(xiàn)象息息相關(guān)。
目前通用的miRNA逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR方法（Stem-Loop莖環(huán)法），原理如下：
技術(shù)優(yōu)勢
（1） 采用miRNA專用提取試劑盒（進口產(chǎn)品）有效從植物、動物中提取miRNA，然后采用莖環(huán)法進行逆轉(zhuǎn)錄，Taqman探針法進行定量PCR分析，從而提高miRNA檢測特異性和靈敏度。
（2） 本公司擁有miRNA定量檢測的多種內(nèi)參，如：U6，SNORD48，SNORD44等多種Human， Rat和Mouse內(nèi)參，有效的提高了miRNA定量PCR精確性。
客戶須知：
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miRNA定量PCR |
周期 |
最終提供客戶資料 |
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miRNA定量PCR |
10-14個工作日（視樣品和基因數(shù)目而定） |
詳細實驗總結(jié)報告（包括RT引物、擴增引物序列、microRNA提取、逆轉(zhuǎn)錄實驗、擴增曲線、標準曲線、樣品重復(fù)結(jié)果、相對表達分析結(jié)果，統(tǒng)計分析等） |
案例：
1. 對于miRNA家族成員設(shè)計不同的莖環(huán)逆轉(zhuǎn)錄引物，從而提高miRNA檢測的特異性。
下面這個實驗從hsa-let家族進行設(shè)計不同的逆轉(zhuǎn)錄引物，而且對定量PCR正向引物進行優(yōu)化，從而有效區(qū)分hsa-let檢測的特異性，如下圖所示：
2. 血清中miRNA表達分析，從中找到與疾病有關(guān)的miRNA分子標志物，以及miRNA轉(zhuǎn)移情況。
血清中miRNA定量一直是目前研究的熱點之一，由于血清中雜蛋白較多，miRNA含量較低，眾多科研人員或公司很難做好血清miRNA定量分析。下面該實驗從正常以及某患者血清中，分離miRNA，從中對hsa-200C-3P、hsa-200C-3P以及hsa-145-5P表達水平進行分析，從而分析miRNA表達與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。本實驗中引入了外參cel-miR-39，準確標準化了血清miRNA提取準確性以及定量數(shù)據(jù)分析的精確性。
客戶提供：
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樣品類型 |
組織樣本 |
細胞樣品 |
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樣品需要量 |
≥200 mg
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≥5-10×106個（相當于六孔板長滿后的一個孔細胞量） |
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取樣和保存環(huán)境 |
新鮮；-80℃凍存或存于組織保存液中；物種及基因名稱（最好提供NCBI中的基因序列號） 物種及miRNA名稱（最好提供miRNA database序列號，其參考網(wǎng)址：http://www.microrna.org/） |
新鮮；-80℃凍存或存于組織保存液中）；物種及基因名稱（最好提供NCBI中的基因序列號） 物種及miRNA名稱（最好提供miRNA database序列號，其參考網(wǎng)址：http://www.microrna.org/） |
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運輸 |
杭州市內(nèi)干冰上門取樣； 外地客戶干冰快遞運輸； 組織保存液，冰袋運輸 |
杭州市內(nèi)干冰上門取樣； 外地客戶干冰快遞運輸；
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*（經(jīng)本公司評估后，實驗沒有結(jié)果，不收取任何費用）
0571-86913236
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